白癜风移植手术系列普及贴（二）——表皮细胞悬液移植（2）
这是关于黑色素悬液移植的第二篇文章，在当年的这篇文章里，许老师指出了黑色素悬液移植的一些不足，以及对于组织工程的构想。她认为组织工程可以分为两种，一种为非扩增的，只以组织工程膜作为黑素细胞悬液的支架，而第二种即为直接的组织工程培养扩增技术，直接从小片皮肤培养成大片。当年的这种构想已成为了现实，下一期，我们就介绍关于组织工程皮肤移植的内容。组织工程膜在自体黑素细胞移植治疗白癜风中的应用白癜风是一种局部皮肤黏膜色素脱失性疾病，目前缺乏有效的治愈手段。自体黑素细胞移治疗白癜风是将自体的黑素细胞补充到色素缺失部位，可以实现较好的复色，代表了白癜风外科治疗技术的发展方向，是目前治疗稳定期白癜风的有效手段。但是该技术仍然存在不足之处, 需要进一步改进。
1 自体黑素细胞移植中存在的问题黑素细胞移植技术可以以较小的皮肤取材，治疗较大范围的皮损，具有良好的应用前景。该技术成功与否的关键，是黑素细胞能否在移植床部位顺利地黏附，进而生长、增殖。目前，黑素细胞移植是以细胞悬液的形式进行的。细胞悬液具有流动性，会造成黑素细胞在移植床部位附着在一定困难，尤其是关节、口周等活动部位，这些部位也是白癜风治疗中的“难治部位”；另一方面, 细胞悬液置于移植床后, 所处的培养环境有了很大的改变,不利于细胞保持正常的活性状态；另外，在移植后的操作过程中，细胞会有不同程度的损耗。 Mulekar等对白癜风“难治部位”进行移植研究后认为，“难治部位”是一个相对概念，取决于技术的使用，这要求为细胞在移植部位的生长和血管化提供一个最好的环境。因此， 如果开发一种适当的黑素细胞载体，黑素细胞可以在该载体上进行培育后，整体移植到移植床部位，既不会改变细胞的生长状态和生长环境，同时还可以为黑素细胞在移植部位的生长提供必要的支持和保护。应用日益广泛的组织工程学技术为解决这个问题提供了可能。
2 组织工程膜概述组织工程技术这一概念是于1987年由美国iguojia科学基金会正式确立的，即将体外培养扩增的、具有特定生物学功能的种子细胞与生物材料复合，形成细胞- 材料复合物，在体外培养一段时间后植入体内，用以修复或替代病损组织或器官。组织工程的核心是建立由细胞和生物支架材料构成的三维空间复合体。该技术在医学领域已经有了很广泛的应用。
3 组织工程膜在黑素细胞移植方面的应用黑素细胞移植分为培养黑素细胞移植和非培养黑素细胞移植， 区别在于取得健康部位皮肤组织的黑素细胞后，是否经过培养扩增后再进行移植。但是他们的基本原理一样的，就是将黑素细胞一直到白癜风的脱色部位，以达到复色目的。
3.1 组织工程膜在自体非培养黑素细胞移植中的应用非培养黑素细胞移植技术不需要进行细胞培养，在取得黑素细胞后, 立即制备细胞悬液, 然后将细胞悬液移植到经制备的色素脱失部位。因此该技术不需要细胞的运载体，也就不需要将细胞转移到组织工程膜上再进行移植。白癜风是一种皮肤黏膜色素脱失性疾病，需要移植的部位都在身体表面，能否为细胞在皮损处提供良好的生理环境是决定细胞移植效果的关键因素。可以借鉴组织工程膜在床上领域的应用。Olsson等将制备好的表皮基底细胞悬液均匀的移植到色素脱失部位，外用胶原薄膜封包，再用以M 2培养液浸湿的纱布外包扎，胶原膜对黑素细胞的定植生长有益处，外层的培养液也可以利用胶原膜的通透性为黑素细胞提供营养。
3.2 组织工程化膜在自体培养黑素细胞移植中的应用培养黑素细胞移植可以以较少的健康皮肤取材治疗较大面积的皮损，具有更大的临床推广前景。组织工程材料在黑素细胞的培养和移植中都有重要的应用。
3.2.1 在培养过程中，使用组织工程材料比如羧酸、壳聚糖凝结成膜包被的培养基，可以明显改善细胞的生成条件，并减小收获细胞时对细胞造成的损伤，提高培养黑素细胞的质量，这些研究为移植用生物膜的材料选择积累了经验。
3.2.2 自体培养黑素细胞移植应用初期以细胞悬液移植为主。由于细胞悬液的流动性大、在将贴壁培养的黑素细胞制备成悬液的过程中，细胞的活性难免受到影响等原因, 培养黑素细胞悬液移植的疗效与操作者的技术水平关系密切，需要在移植效果和效果的稳定性方面进行改进。有研究者将透明质酸以溶液的形式掺入到自体黑素细胞悬液中，增加细胞的黏度，使黑素细胞留驻在移植部位，另外，透明质酸还可以促进黑细胞的生长和增殖。这是利用组织工程材料改进移植质量的另一种尝试和探索。还可以在黑素细胞悬液内掺入纤维黏液， 增加液体的黏稠度，同时用纤维来发挥和机体受到创伤后血液凝固相同的三维基质作用, 既促进血液凝固消除伤口，又作为培养基将黑素细胞更好的固定在移植部位。
另外一种方式是将组织工程化材料制成膜片，搭载黑素细胞后进行移植。1998年的一项研究，是在一种经100%苯甲醇酯化的透明质酸生物聚合膜加上培养黑素细胞-角质形成细胞，然后将携带经培养的混合细胞的该聚合膜剪裁成与皮损区相适应的大小和形状，贴附在做好移植准备的色素脱失部位，取得了60%的完全复色率。
新的工艺不断出现。使黑素细胞粘附在猪的凝胶微细颗粒上将其作为为载体，使用去血清培养液培养，可以作为治疗大面积白癜风的手段。使用羊膜作为培养黑素细胞的移植载体是黑素细胞移植上的一个重要的突破。
首先对羊膜进行灭活去细胞处理，制成组织工程膜， 然后将培养扩增后的细胞转移到该膜上，养后应用到色素脱失部位, 取得了95 ~ 100% 的复色率。该研究应用了标准的组织工程技术, 取得如此好的疗效，令人鼓舞。
国内有研究者将黑素细胞作为种子细胞，以明胶/壳聚糖膜为支架材料构建皮肤替代物, 移植到全层缺损的小鼠体表后， 6周后可见稳定的色素加深现象出现。该研究表明组织工程支架材料能有效的为黑素细胞提供良好的生长增殖环境， 帮助黑素细胞顺利的在体表定植。该实验是在裸鼠上进行的, 对于该膜的安全性需要进一步测定。
4 小结培养黑素细胞移植技术的发展表明，黑素细胞结合到一个良好的载体上然后进行移植可以很大程度上提高移植的效果和效果的稳定性。组织工程膜以其微观三维结构，可以为黑素细胞的生长增殖提供必要的微环境，将黑素细胞在组织工程膜上培养后进行移植可以最大限度地保证移植细胞的数量和活性；即使是不需要载体的非培养黑素细胞移植，组织工程化膜作为敷料同样可以为黑素细胞的顺利定植提供支持。因此,组织工程膜在黑素细胞移植技术中有着良好的应用前景。
这个比较专业了 土豆不烂 发表于 2014-10-29 22:16
这个比较专业了
这篇文章比较早了，10年发表的，主要是讲的当年许老师设想的，通过哪几种方式完成组织工程膜这个概念。其实现在已经有组织工程的手术了，不止用于白癜风方面，烧伤、美容、器官移植等等都需要的。:lol 谢谢分享，学习了。 表皮细胞悬液移植，有人做过没 楼主权威啊！http://www.bbsls.net//mobcent//app/data/phiz/default/23.pnghttp://www.bbsls.net//mobcent//app/data/phiz/default/23.pnghttp://www.bbsls.net//mobcent//app/data/phiz/default/23.png
特别想去拜访许老师，感谢许老师为白癜风患友做出的重大贡献，感谢aviatorlee的分享 现在临床已经应用了吗？
2014年的帖子说细胞培养需要加入TPA，TPA的安全性尚有争论，国外已经用BFGF取代了TPA，但国内引进不了。想问下，现在国内临床上细胞培养是否还是采用TPA？还是用别的？因为现在在考虑给孩子做移植https://www.bbsls.net//mobcent//app/data/phiz/default/00.png
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